Marine Biology

fa شناسایی باکتری های جدید با فعالیت آمیلازی بالا در سواحل چوئبده آبادان، بهینه سازی و خالص سازی آنزیم با فعالیت قابل توجه در سویه ی جدید Salinicoccus roseus- Persiangulf TA4 Identification of new bacteria with high amylase activity in Abadan Choebdeh coast, optimization and purification of enzyme with significant activity in the new strain Salinicoccus roseus- Persiangulf TA4 شیلات Fisheries پژوهشي Research <div style="text-align: justify;">خلیجفارس به دلیل داشتن ساختار اکولوژیکی منحصر به فرد، زیستگاه انواع باکتریهای دریایی با پتانسیل تولید آنزیمهای هیدرولیتیک مانند آمیلاز است. با توجه به اهمیت آنزیمهای میکروبی در صنایع مختلف، این مطالعه با هدف شناسایی، بهینهسازی و خالصسازی آنزیم آمیلاز از سویههای جدید باکتریایی جدا شده از شمال خلیجفارس (بندر چوئبده آبادان) برای اولین بار صورت گرفت. نمونهبرداری در فصل پاییز، سال 1398 از 10 ایستگاه مختلف (نمونه آب و رسوب) در شرایط کاملاً استریل انجام شد. با بررسی فیلوژنیک توالی 16S rRNA، سویههای جدید مولد آمیلاز شامل Salinicoccus roseus- Persiangulf TA4 ، hydrophila- Persiangulf TA8  Aeromonas  و Pseudomonas oleovorans - Persiangulf T10   شناسایی شدند. سویهی جدید  Persiangulf TA4، فعالیت آمیلازی قابل توجهی را نسبت به سایر سویهها نشان داد. شرایط بهینه رشد برای سویههای TA4، TA8 و TA10 به ترتیب دمای 37، 30 و 37-30 درجه سانتیگراد و pH بهینه 5/7، 5/7 و 7-6 و غلظت نمک بهینه 5/7، 0/0 و  5/2 درصد بود. سویهی نمک دوست TA4، در غلظت 25 درصد نمک نیز قادر به رشد بود. شرایط بهینه برای تولید آنزیم توسط سویه TA4 به ترتیب بعد از 48 ساعت انکوباسیون، دمای 35 درجه سانتیگراد و 7 =pH تشخیص داده شد. همچنین نشاسته و پپتون تولید آمیلاز بیشتری را القا کردند. آنزیم خالص شده در مرحله کروماتوگرافی با فعالیت اختصاصی بالا (87/8  واحد/میلیگرم) یافت شد. دما و pH بهینه برای فعالیت آنزیم خالص شده، دمای 60 درجه سانتیگراد و 9 =pH بود.  این آنزیم در رنج وسیعی از دما و pH قادر به حفظ بخش عمدهای از فعالیت خود بود، بهطوریکه در دمای 65-45 درجه سانتیگراد قادر به حفظ  100-90 درصد از فعالیت و در دمای 70 درجه سانتیگراد، 33/80 درصد از فعالیت خود را داشت. همچنین این آنزیم در محدوده 11-6 =pH قادر به حفظ 100-80 درصد از فعالیت خود بود. کاربرد صنعتی این آنزیم جدید TA4، با توجه به ویژگیهای جالب توجه آن با بررسی بیشتر توصیه می شود.</div> <div style="text-align: justify;">Persian Gulf, due to its unique ecological structure, is the habitat of marine bacteria with the potential to produce hydrolytic enzymes such as amylase. Due to the importance of microbial enzymes in various industries, this study was conducted for the first time with the aim of identifying, optimizing and purifying amylase enzyme from new bacterial strains isolated from the north of the Persian Gulf (Abadan Choebdeh port). Sampling was done in autumn, 2019 from 10 different stations (water and sediment samples) in completely sterile conditions. Phylogenetic analysis of 16S rRNA sequences identified new amylase-producing strains including Salinicoccus roseus-Persiangulf TA4, Aeromonas hydrophila-Persiangulf TA8 and Pseudomonas oleovorans-Persiangulf T10. The new Persiangulf TA4 strain showed significant amylase activity compared to other strains. The optimum growth temperatures for strains TA4, TA8 and TA10 were 37, 30 and 37-30 ° C, respectively. The optimal growth pH for the three strains was 7/5, 7/5 and 6-7, respectively, and the optimal salt concentration for the growth of these bacteria was 7/5%, 0/0 %and  2/5%, respectively. The hydrophilic strain of TA4 was also able to grow at 25% salt concentration. Optimal conditions for enzyme production were detected by TA4 strain after 48 hours of incubation, 35 ° C and  pH 7, respectively. Also, starch and peptone induced higher amylase production. High specific activity (8.87 U / mg) was found in chromatography step. The optimum temperature and pH for the purified enzyme activity were 60 ° C and  pH 9. This enzyme was able to maintain most of its activity in a wide range of temperature and pH, so that it was able to maintain  90-100% of its activity at 65-45 ° C and at  80/33% at 70 ° C. Also, this enzyme was able to maintain  80-100% of its activity in the pH range of 6-11. The industrial application of this new TA4 enzyme is recommended for further investigation due to its interesting properties.</div> Salinicoccus roseus , آمیلاز, خلیج فارس, بهینه‌سازی, خالص سازی. Salinicoccus roseus, Amylase, Persian Gulf, Optimization, Purification. 1 18 http://jmb.ahvaz.iau.ir/browse.php?a_code=A-10-683-2&slc_lang=fa&sid=1 Sara 1, 2 *, 3, ani 4, Parvaneh Saffarian Taghavi سارا تقوی 10031947532846006697 10031947532846006697 No Roya Zekavati رویا ذکاوتی 10031947532846006698 10031947532846006698 Yes Effat Abbasi Montazeri عفت عباسی منتظری 10031947532846006699 10031947532846006699 No Laleh Roomi لاله رومیانی 10031947532846006700 10031947532846006700 No