Marine Biology

fa شناسایی باکتری Aeromonas caviae با قابلیت تولید آنزیم لیپاز از شمال خلیج فارس (بهینه سازی و خالص سازی آنزیم) Identification of Aeromonas caviae Bacterium with Lipase-Producing Capability from the Northern Persian Gulf (Optimization and Purification of the Enzyme) بیولوژی biology پژوهشي Research امروزه آنزیم ‌های مشتق از میکروارگانیسم‌های آبزی به علت داشتن ویژگی‌های منحصربه ‌فرد از جمله پایداری در شرایط متنوع صنعتی بسیار مورد توجه قرار گرفته اند. بنابراین این مطالعه با هدف شناسایی باکتری مولد آنزیم پرکاربرد صنعتی لیپاز و بررسی کارایی آن در شمال خلیچ فارس در محدوده ی بندر چوئبده آبادان برای اولین بار انجام شد. نمونه برداری در این منطقه از آب و رسوب انجام شد. در غربالگری اولیه، از محیط کشت با سوبسترای اختصاصی برای جداسازی باکتری های مولد آنزیم لیپاز انجام شد و سپس شناسایی سویه مورد نظر با استفاده از روش توالی یابی ژن S rRNA16 انجام شد. تولید آنزیم در شرایط مختلف از نظر زمان انکوباسیون، دما، pH، منبع کربن و نیتروژن توسط روش یک عامل در زمان و سپس توسط روش پلاکت برمن بهینه سازی شد. در نهایت خالص سازی آنزیم به وسیله روش های رسوب دادن با سولفات آمونیوم، دیالیز و کروماتوگرافی ژل فیلتراسیون (سفادکس G-100) انجام گردید. باکتری مولد آنزیم لیپاز با فعالیت قابل توجه توجه پس از بهینه سازی (U/ml/min 35) به عنوان باکتری Aeromonas caviae  سویه Persiangulf TA14 شناسایی شد. شرایط بهینه برای فعالیت آنزیم لیپاز مورد نظر در روز اول انکوباسیون (ساعت بیست) در دمای 37 درجه سانتی گراد، pH  برابر 7 و محیط کشت حاوی روغن زیتون و پپتون مشاهده شد. فاکتورهای تاثیرگذار به ترتیب میزان روغن زیتون وpH بود. آنزیم خالص شده دارای فعالیت اختصاصی بالا (U/mg 23/88) و مرتبه خالص سازی (41/7) بود. نتایج حاصل از این پژوهش نشان داد که آنزیم لیپاز مستخرج از  باکتری Aeromonas caviae   دارای فعالیت آنزیمی قابل توجه می باشد. بنابراین این باکتری به علت داشتن آنزیم های مقاوم و کارآمد به‌خصوص در صنایع غذایی و بیوتکنولوژی، می تواند یک منبع مناسب برای تولید لیپازهای صنعتی باشد.   In recent years, enzymes derived from aquatic microorganisms have attracted significant attention due to their unique characteristics, including stability under diverse industrial conditions. Accordingly, this study was conducted for the first time with the aim of identifying a bacterium capable of producing the industrially important enzyme lipase and evaluating its performance in the northern Persian Gulf, specifically in the Chouebdeh Port area of Abadan. Sampling was carried out from water and sediment in this region. In the initial screening, a culture medium containing a specific substrate was used to isolate lipase-producing bacteria, followed by identification of the target strain using 16S rRNA gene sequencing. Enzyme production under different conditions, including incubation time, temperature, pH, and carbon and nitrogen sources, was optimized first using the One Factor at a Time method and subsequently by the Plackett–Burman design. Finally, enzyme purification was performed using ammonium sulfate precipitation, dialysis, and gel filtration chromatography (Sephadex G-100). The lipase-producing bacterium with significant enzymatic activity (35 U/ml/min) after optimization was identified as Aeromonas caviae strain Persiangulf TA14. Optimal conditions for the activity of the lipase enzyme were observed on the first day of incubation (20 hours) at 37°C, pH 7, in a culture medium containing olive oil and peptone. The most influential factors were olive oil concentration and pH, respectively. The purified enzyme exhibited high specific activity (23.88 U/mg) and a purification fold of 41.7. The results of this study demonstrated that the lipase enzyme extracted from Aeromonas caviae possesses considerable enzymatic activity. Therefore, due to its resistant and efficient enzymes, particularly for applications in the food and biotechnology industries, this bacterium can be considered a suitable source for industrial lipase production.   آئروموناس کاوایی, آنزیم لیپاز, خلیج فارس Aeromonas caviae, lipase enzyme, Persian Gulf. 55 69 http://jmb.ahvaz.iau.ir/browse.php?a_code=A-10-737-1&slc_lang=fa&sid=1 Sara Taghavi سارا تقوی sara.taghavi@iau.ac.ir 10031947532846007630 10031947532846007630 Yes Science and Research Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran. دانشگاه علوم و تحقیقات تهران Roya Zekavati رویا ذکاوتی rzekavati@yahoo.com 10031947532846007631 10031947532846007631 No Ahvaz Branch, Islamic Azad University, Ahvaz, Iran. دانشگاه آزاد اهواز Effat Abbasi Montazeri عفت عباسی منتظری dr.abbasii@yahoo.com 10031947532846007632 10031947532846007632 No Ahvaz Jundishapur University of Medical Sciences, Ahvaz, Iran. دانشگاه جندی شاپور اهواز Laleh Roomiani لاله رومیانی l.roomiani@yahoo.com 10031947532846007633 10031947532846007633 No Ahvaz Branch, Islamic Azad University, Ahvaz, Iran. دانشگاه آزاد اهواز